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1、血清肌酐Creatine苦味酸法測定 1. 實驗原理 不去除蛋白的Jaffe堿性苦味酸連續(xù)監(jiān)測比色法。肌酐與苦味酸在堿性條件下形成橙紅色復(fù)合物，在固定的時間內(nèi)吸光度增加速率與樣品中肌酐濃度呈正比。 肌酐 + 苦味酸 肌酐苦味酸復(fù)合物 2. 標本采集 2.1 病人準備：早晨空腹采血（空腹12小時左右），靜脈采血。 2.2 類型：血清，肝素血漿，尿液。 3. 標本存放：血清、血漿的穩(wěn)定性：4～25℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存至少可穩(wěn)定3個月。尿液的穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定2天；4～8℃保存可穩(wěn)定6天；-20℃保存可穩(wěn)定6個月 對尿液用蒸餾水作1

2、:49稀釋后檢測，結(jié)果乘50后報告。 4. 標本運輸：常溫條件下運輸 5. 標本拒收的標準：細菌污染的標本不能作測定。 6. 實驗材料 6.1 奧林巴斯肌酐檢測 試劑盒試劑1：＋試劑2： 6.1.1 試劑準備：試劑為即用式。 6.1.2 試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～25℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。 6.1.3 變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。 6.1.4 注意事項：試劑1中含氫氧化鈉。請按以下條例處理：R36/38: 刺激眼睛和皮膚。S26:如與眼睛接觸應(yīng)立即用大量水沖洗并請醫(yī)生診視。S

3、37/39:戴上手套并采取合適的眼/臉的防護。S45:如發(fā)生事故或感覺不適立即請醫(yī)生診視。試劑2中含苦味酸。吸入、接觸皮膚、吞咽將會中毒。戴上手套并采取合適的眼/臉的防護。如與皮膚接觸應(yīng)立即用聚乙二醇400（DAB8）或大量水沖洗。如情況嚴重，立即請醫(yī)生診視。使用實驗室試劑應(yīng)采取必要的預(yù)防。 6.2 校準品：使用奧林巴斯公司提供的校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。 6.3 質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。 7. 儀器：奧林巴斯AU2700生化分析儀 8. 操作步驟 8.1 項目基本參數(shù)：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析

4、儀項目測定參數(shù).SOP文件 8.2 儀器操作步驟：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件 9. 結(jié)果的判斷與分析 10. 質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。 11. 計算方法：以TruCal U復(fù)合校準品肌酐校準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠檢測結(jié)果，以mmol/L報告。 12. 參考值范圍 血清/血漿[1] 女性 53～97mmol/L 男性 80～

5、115mmol/L 尿液[1] 女性 97～177mmol/L 男性 124～230mmol/L 肌酐清除率[2] 女性 95～160ml/min/1.73m2 男性 98～156 ml/min/1.73m2 13. 臨床意義：肌酐是通過腎臟經(jīng)由腎小球濾過作用排泄的廢物。健康人血漿中肌酐的濃度相當(dāng)穩(wěn)定，與每天水的攝取量、活動和生成尿量無關(guān)。因此血漿肌酐水平升高常指示排泄量的降低，即腎功能受損。肌酐清除率能較好地評估腎小球濾過率（GFR），通過它能較好地檢出腎病和監(jiān)視腎功能。為此，在規(guī)定的時間內(nèi)同時收集血清和尿液，進行肌酐檢測。

6、肌酐經(jīng)腎小球濾過后不被腎小管重吸收,通過腎小管排泄。在腎臟疾病初期,血清肌酐值通常不升高,直至腎臟實質(zhì)性損害,血清肌酐值才增高。在正常腎血流條件下，肌酐值如升高至176～353μmol/L,提示為中度至嚴重的腎損害。所以,血肌酐測定對晚期腎臟病臨床意義較大。 14. 操作性能 14.1 線性范圍：18～1330μmol/L 14.2 精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU2700批內(nèi)不精密度小于3%，總不精密度小于5%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。 批內(nèi)精密度 n=20 (mmol/L) s (mmol/L) CV (%)

7、 批間精密度 n=20 (mmol/L) s (mmol/L) CV (%) 樣品1 71.6 2.6 3.63 樣品1 69.8 4.5 6.45 樣品2 141.4 1.2 0.87 樣品2 137.9 3.3 2.38 樣品3 506.5 4.3 0.85 樣品3 507.4 4.2 0.83 14.3 方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對68個樣品進行Crea檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.01x-2.65mmol/L；r =1.000。 14.4 靈敏度：本試劑的檢測限

8、為18mmol/L。。 14.5 病人結(jié)果可報告范圍：18～1330mmol/L 15. 超出范圍結(jié)果處理：本法對肌酐的檢測范圍為18～1330mmol/L。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L的氯化鈉溶液作1+1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。 16. 病危報警值的處理：當(dāng)肌酐測定值>352mmol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。 17. 方法局限性 17.1 本法對肌酐的檢測范圍為18～1330mmol/L。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L的氯化鈉溶液作1+ 1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。 17.2 干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度￡170

9、4mmol/L，血紅蛋白濃度￡5.00g/L，甘油三酯濃度￡22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。膽紅素濃度368.8mmol/L起有干擾 18. 補救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。 19. 參考文獻 1. Newman DJ, Price CP. Renal function and nitrogen metabolites. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. p. 1204-. 2. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p. 366-74. 20. 其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。