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1、HLA-B27與強(qiáng)直性脊柱炎,1,強(qiáng)制性脊柱炎AS,強(qiáng)制性脊柱炎（AS）是一種主要累及脊柱，中軸骨和四肢大關(guān)節(jié)，以椎間盤(pán)纖維環(huán)及其附近結(jié)締組織纖維化和骨化及關(guān)節(jié)強(qiáng)直為病變特點(diǎn)的慢性炎癥。其特征是病變從骶髂關(guān)節(jié)開(kāi)始，逐步上升蔓延至脊柱關(guān)節(jié)，造成骨性強(qiáng)直。,2,3,病理變化,本病早期病理變化為肌腱，韌帶骨附著點(diǎn)炎，也可發(fā)生一定程度的滑膜炎癥，常以骶髂關(guān)節(jié)發(fā)病最早，以后可發(fā)生關(guān)節(jié)粘連，纖維性和骨性強(qiáng)直，組織學(xué)改變?yōu)殛P(guān)節(jié)囊，肌腱，韌帶的慢性炎癥，伴有淋巴細(xì)胞，漿細(xì)胞浸潤(rùn)，這些炎性細(xì)胞成團(tuán)分布于較小的滑膜血管周?chē)?4,骶髂關(guān)節(jié)炎是強(qiáng)直性脊柱炎的病理標(biāo)志，也常是其最早的病理表現(xiàn)之一，骶髂關(guān)節(jié)炎的早期病理

2、變化包括軟骨下肉芽組織形成，組織學(xué)上可見(jiàn)滑膜增生和淋巴樣細(xì)胞及漿細(xì)胞聚集，淋巴樣濾泡形成以及含有IgG，IgA和IgM的漿細(xì)胞，骨骼的侵蝕和軟骨的破壞隨之發(fā)生，然后逐漸被退變的纖維軟骨替代，最終發(fā)生骨性強(qiáng)直，脊柱的最初損害是椎間盤(pán)纖維環(huán)和椎骨邊緣連接處的肉芽組織形成，纖維環(huán)外層可能最終被骨替代，形成韌帶骨贅，進(jìn)一步發(fā)展將形成X線所見(jiàn)的竹節(jié)樣脊柱。,5,AS的檢查,體格檢查 影像學(xué)檢查 早期表現(xiàn)為骶髂關(guān)節(jié)炎，可根據(jù)疾病不同時(shí)期選擇X線，CT,MRI檢查。 實(shí)驗(yàn)室檢查 活動(dòng)期可有ESR,CRP,PLT和血清IGA升高，類(lèi)風(fēng)濕因子陰性 90%患者HLA-B27陽(yáng)性,6,HLA-B27檢測(cè)及其臨床應(yīng)用

3、,什么是HLA及HLA-B27 MHC、HLA，HLA-B27 HLA-B27與哪些疾病相關(guān) 血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病 類(lèi)型及特點(diǎn) 強(qiáng)直性脊柱炎 特點(diǎn)及其與B27關(guān)聯(lián)機(jī)制 HLA-B27 怎么檢測(cè) MLCT、FCM、PCR-SSP,7,HLA相關(guān)概念,主要組織相容性抗原 主要組織相容性復(fù)合體（ MHC 類(lèi))：H-2 SLA HLA MHC、HLA復(fù)合體基因 MHC分子、HLA分子抗原 HLA：人類(lèi)白細(xì)胞抗原（ Human Leukocyte Antigen）,8,HLA抗原是人類(lèi)主要組織相容性復(fù)合體（Major Histocompatibity Complex， MHC）的表達(dá)產(chǎn)物，在免疫系統(tǒng)中主要

4、負(fù)責(zé)細(xì)胞之間的相互識(shí)別和誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的功能。根據(jù)HLA抗原結(jié)構(gòu)，功能與組織分布的不同，可分為三類(lèi)：類(lèi)分子為HLA-A、-B、-C系列抗原，廣泛分布于各組織有核細(xì)胞表面，包括血小板和網(wǎng)織紅細(xì)胞，成熟的紅細(xì)胞一般不含HLA抗原；類(lèi)分子為HLA-D/DR、-DP、-DQ系列抗原，主要在B細(xì)胞和抗原提呈細(xì)胞上表達(dá)，這兩類(lèi)抗原都與移植有關(guān)，其中類(lèi)抗原更為重要；類(lèi)分子為補(bǔ)體成分。,9,HLA-B27基因?qū)儆谛蚆HC基因，基本上表達(dá)在機(jī)體中所有含核的細(xì)胞上，尤其是淋巴細(xì)胞的表面有豐富的含量 早在二十多年前，人們就已發(fā)現(xiàn)HLA-B27抗原的表達(dá)與強(qiáng)直性脊椎炎有著高度相關(guān)性，超過(guò)90%的強(qiáng)直性脊椎

5、炎患者其HLA-B27抗原表達(dá)為陽(yáng)性，普通人群中僅5-10%的為陽(yáng)性，而強(qiáng)直性脊椎炎由于其癥狀與許多疾病相似而難以確診，因此HLA-B27的檢測(cè)在病情的診斷中有著重要意義。,10,HLA-B27相關(guān)疾病,11,HLA-B27相關(guān)疾?。簭?qiáng)直性脊柱炎,患病率：0.3%，20-30歲，男女比例 10:1，有家族傾向； 主要侵犯：中軸關(guān)節(jié)（骶髂關(guān)節(jié)、脊柱骨突、脊柱旁軟組織） 可伴發(fā)外周關(guān)節(jié)及關(guān)節(jié)外表現(xiàn)，嚴(yán)重者發(fā)生脊柱畸形和關(guān)節(jié)強(qiáng)直 B27檢測(cè)可作為有相關(guān)癥狀或高危人群AS早期的篩選方法！ AS不是RA的一種特殊類(lèi)型！,12,HLA-B27與AS,13,HLA-B27與AS,14,健康人群HLA-B27

6、陽(yáng)性率及AS患病率各地區(qū)、種族有顯著的差異 HLAB27與強(qiáng)直性脊柱炎的發(fā)病有很強(qiáng)的相關(guān)性 兩種錯(cuò)誤認(rèn)識(shí)需糾正：HLA-B27陽(yáng)性AS！ HLA-B27陽(yáng)性不會(huì)轉(zhuǎn)陰！,HLA-B27與AS的關(guān)聯(lián)機(jī)制,連鎖不平衡學(xué)說(shuō) 分子模擬學(xué)說(shuō) 關(guān)節(jié)源性肽假說(shuō) 其他：T細(xì)胞受體庫(kù)假說(shuō)超抗原假說(shuō)B27修飾因子假說(shuō)Cys67模型,15,張谷香醫(yī)學(xué)綜述，2012,18(4):498-501,HLA基因座位的等位基因和真正的疾病易感基因處于緊密連鎖不平衡，而HLA基因本身并不是引起疾病的真正基因，僅僅是遺傳標(biāo)志。,B27抗原與某些G（-）菌之間存在類(lèi)似的分子結(jié)構(gòu)，能發(fā)生分子模擬或交叉反應(yīng)，機(jī)體免疫系統(tǒng)把B27當(dāng)作病原

7、體抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生免疫損害。,認(rèn)為關(guān)節(jié)源性肽只存在于關(guān)節(jié)組織中，特異性地由HLAB27提呈，正常情況下遞呈水平低，反應(yīng)T細(xì)胞處于耐受狀態(tài)；當(dāng)某些具有同源結(jié)構(gòu)蛋白的病毒或細(xì)菌感染時(shí)，則可致敏耐受的T細(xì)胞，從而識(shí)別以低水平遞呈的關(guān)節(jié)源性肽，引起自身免疫反應(yīng)而損傷組織。,AS發(fā)病原因機(jī)制目前尚未完全闡明，大多數(shù) 學(xué)者認(rèn)為其與遺傳，感染，免疫，環(huán)境因素 等有關(guān)。,16,HLA-B27檢測(cè)方法,抗原水平 微量細(xì)胞毒法 流式細(xì)胞術(shù)法 基因水平 PCR-SSP,17,微量細(xì)胞毒法（MLCT）,原理：如果受試者淋巴細(xì)胞表面表達(dá)有相應(yīng)的HLA-B27抗原，就可以與B27抗體結(jié)合，形成Ag-Ab復(fù)合物

8、激活補(bǔ)體，發(fā)生對(duì)細(xì)胞膜的破壞及細(xì)胞殺傷作用，通過(guò)染色法觀察，死細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性改變，染料能夠進(jìn)入使之著色，而活細(xì)胞細(xì)胞膜完整不被染色。根據(jù)死細(xì)胞占全部細(xì)胞的百分比，可以判斷受試者淋巴細(xì)胞表面是否存在HLA-B27抗原及其與抗體的反應(yīng)強(qiáng)度。 優(yōu)點(diǎn)：不需特殊儀器設(shè)備，易于操作，一般的實(shí)驗(yàn)室都可開(kāi)展。 缺點(diǎn)：標(biāo)本存放不能超過(guò)8小時(shí)；感染可以使細(xì)胞膜表面的B27分子的數(shù)量或結(jié)構(gòu)改變，影響MLCT的結(jié)果，易出現(xiàn)假陰性。,18,J.Kirveskari, et al. British Journal of Rheumatology, 1997,36:185-189,流式細(xì)胞術(shù)法,利用熒光標(biāo)記的HLA-B

9、27單克隆抗體，與細(xì)胞表面的B27抗原結(jié)合，使結(jié)合后的淋巴細(xì)胞具有一定的熒光強(qiáng)度，這種熒光強(qiáng)度可由流式細(xì)胞儀測(cè)得的通道值來(lái)反映，以其值的高低判斷HLA-B27抗原表達(dá)百分比，從而判斷HLA-B27是否陽(yáng)性。 優(yōu)點(diǎn)：全自動(dòng)儀器檢測(cè)，減少了人為因素的影響，重復(fù)性高，結(jié)果判斷準(zhǔn)確，為目前較為理想的方法，目前已將FCM法檢測(cè)HLA-B27作為AS 診斷的常規(guī)檢測(cè)方法。 缺點(diǎn)：儀器昂貴，目前只在較大醫(yī)院應(yīng)用，且熒光易淬滅。,19,Levering WH，et al. JCytometry B Clin Cytom，2003,54(1):28-38,PCR-SSP,通過(guò)設(shè)計(jì)基因序列特異的引物SSP，特異性

10、的擴(kuò)增出標(biāo)本中的HLA-B27基因片段，以瓊脂糖凝膠電泳分析PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，若出現(xiàn)目的條帶則表示HLA-B27為陽(yáng)性。 優(yōu)點(diǎn)：基因水平的檢測(cè) 直接對(duì)HLA-B27原基因進(jìn)行擴(kuò)增分型，靈敏度高，特異性強(qiáng)。 缺點(diǎn)：耗時(shí)長(zhǎng)，需要跑電泳，需要特定的實(shí)驗(yàn)儀器及嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)條件，在臨床上普遍開(kāi)展此項(xiàng)檢查有一定的難處。,20,Olerup OTissue Antigens，1994,43(4):253-256,總結(jié),HLA-B27陽(yáng)性人群也不用太過(guò)緊張，但應(yīng)注意積極預(yù)防,首先在平時(shí)生活中要適當(dāng)?shù)腻憻捝眢w，增加戶外運(yùn)動(dòng)，注意保暖，尤其是腰背部，注意飲食結(jié)構(gòu)，控制煙酒，預(yù)防呼吸道、消化道和生殖道感染，防止外傷；其次要克制思想麻痹，如果發(fā)現(xiàn)有關(guān)節(jié)疼痛、晨僵等早期癥狀要及時(shí)就醫(yī)，盡快治療。,21,Thanks for your listen!,22,